Plečiantis kultūros mastui ir didėjant kultūros tankumui, Apostichopus japonicus liga tapo vis reikšmingesnė ir atnešė didelių nuostolių akvakultūros pramonei. Apostichopus japonicus ligas daugiausia sukelia bakterijos, virusai ir blakstienotieji, iš kurių sunkiausia yra odos puvinio sindromas, kurį sukelia Vibrio brilliant. Ligai paūmėjus, Apostichopus japonicus kūno sienelėse atsiranda opų, susidaro mėlynos ir baltos dėmės, kurios galiausiai savaime išnyksta, ištirpdamos nosies gleivėse, panašiose į koloidą. Tradicinėje ligų prevencijoje ir gydyme plačiai naudojami antibiotikai. Tačiau ilgalaikis antibiotikų vartojimas kelia ne tik paslėptą bakterijų atsparumo ir vaistų likučių pavojų, bet ir didina maisto saugą bei aplinkos taršą. Todėl neteršiančio, be likučių, saugaus preparato, skirto sumažinti jūros agurkų ligą, kūrimas yra viena iš dabartinių tyrimų karštųjų vietų.

Kalio diformiatas yra balti kristaliniai birūs milteliai, sausi ir beskoniai. Tai pirmasis neantibiotinis pašarų priedas, patvirtintas Europos Sąjungos, skirtas pakeisti antibiotikus. Jis gali skatinti kultūrinių gyvūnų augimą, slopinti kenksmingų bakterijų augimą ir gerinti žarnyno aplinką. Kalio diformiatas gali žymiai pagerinti vandens organizmų augimą ir produktyvumą.

1 Testo rezultatai

1.1 Maisto kalio diformiato poveikis jūros agurkų Apostichopus japonicus augimui ir išgyvenimui

Apostichopus japonicus savitasis augimo greitis reikšmingai padidėjo didėjant kalio diformiato kiekiui pašaruose. Kai kalio diformiato kiekis pašaruose pasiekė 0,8 %, t. y. kai kalio diformiato kiekis pašaruose buvo atitinkamai 1,0 % ir 1,2 %, Apostichopus japonicus savitasis augimo greitis buvo reikšmingai didesnis nei grupuojant kitus apdorojimo būdus, tačiau reikšmingo skirtumo nebuvo (P > 0,05) (2-2 lentelė). Jūros agurkų išgyvenamumas visose grupėse buvo 100 %.

1.2 Maisto kalio diformiato poveikis jūros agurko Apostichopus japonicus imuniniams rodikliams

Palyginti su kontroline grupe, skirtingi kalio dikarboksilato kiekiai galėjo skirtingu laipsniu pagerinti celomocitų fagocitinį pajėgumą ir O2 gamybą (2-3 lentelė). Kai kalio diformiato buvo pridėta 1,0% ir 1,2%, celomocitų fagocitinis aktyvumas ir reaktyviųjų deguonies formų O2 gamyba jūros agurkuose buvo žymiai didesni nei kontrolinėje grupėje, tačiau reikšmingų skirtumų tarp 1% ir 1,2% kalio diformiato grupių, taip pat tarp kitų kalio diformiato kiekių ir kontrolinės grupės nebuvo. Padidėjus kalio dikarboksilato kiekiui pašaruose, jūros agurkų SOD ir NOS padidėjo.

1.3 Maistinio kalio diformiato poveikis jūros agurkų atsparumui Vibrio brilliant infekcijai

Praėjus 1,4 dienos po užkrėtimo, bendras jūros agurkų mirtingumas kontrolinėje grupėje buvo 46,67 %, tai yra žymiai daugiau nei 0,4 %, 0,6 %, 0,8 %, 1,0 % ir 1,2 % kalio diformiato grupėse (26,67 %, 26,67 %, 30 %, 30 % ir 23,33 %), tačiau reikšmingo skirtumo su 0,2 % gydymo grupe (38,33 %) nebuvo. Jūros agurkų mirtingumas 0,4 %, 0,6 %, 0,8 %, 1,0 % ir 1,2 % kalio diformiato grupėse reikšmingo skirtumo neturėjo.

2. Diskusija

2.1 Kalio dikarboksilato poveikis jūros agurko Apostichopus japonicus augimui

Gyvūnams kalio dikarboksilato veikimo mechanizmas daugiausia yra patekti į virškinamąjį traktą, pagerinti virškinimo trakto aplinką, reguliuoti pH ir naikinti kenksmingas bakterijas (Ramli ir Sunanto, 2005). Be to, kalio diformiatas taip pat gali skatinti maistinių medžiagų įsisavinimą iš pašarų ir pagerinti auginamų gyvūnų virškinamumą bei panaudojimo greitį. Naudojant vandens gyvūnams, eksperimentai parodė, kad kalio diformiatas gali žymiai pagerinti krevečių augimą ir išgyvenamumą (he Suxu, Zhou Zhigang ir kt., 2006). Šiame tyrime jūros agurkų (Apostichopus japonicus) augimas buvo skatinamas į pašarus įdedant kalio dikarboksilato, o tai atitiko Verland. M (2000) pateiktus kalio dikarboksilato naudojimo paršeliams ir penimoms kiaulėms rezultatus.

2.2 Kalio dikarboksilato poveikis jūros agurko Apostichopus japonicus imunitetui

Apostichopus japonicus turi tą patį gynybos mechanizmą kaip ir kiti dygiaodžiai, kurį papildo ląstelinis ir neląstelinis (humoralinis) imuninis atsakas. Jis daugiausia naudojamas svetimkūniams, patenkantiems į gyvūno organizmą, atpažinti ir pašalinti arba svetimkūnius paversti nekenksmingomis medžiagomis ir žaizdoms gydyti. Dygiaodžių ląstelinį imuninį atsaką užbaigia įvairūs celomocitai, kurie sudaro dygiaodžių gynybos sistemą. Pagrindinės šių ląstelių funkcijos apima fagocitozę, citotoksinų reakciją ir antibakterinių medžiagų gamybą krešėjimo lygmenyje (kudriavtsev, 2000). Fagocitozės metu bakterijos arba bakterijų ląstelių sienelių komponentai gali paskatinti celomocitus gaminti reaktyviąsias deguonies formas (ROS), įskaitant no, H2O2, OH ir O2-. Šiame eksperimente į racioną įtraukus 1,0% ir 1,2% kalio dikarboksilato, žymiai padidėjo celomocitų fagocitinis aktyvumas ir reaktyviųjų deguonies formų gamyba. Tačiau kalio diformiato, didinančio fagocitinį aktyvumą ir O2- gamybą, mechanizmas turi būti toliau tiriamas.

2.3 Kalio dikarboksilato poveikis jūros agurko Apostichopus japonicus žarnyno florai

Kalio dikarboksilatas silpnai šarminėje aplinkoje gali būti suskaidomas į skruzdžių rūgštį ir formiatą ir per ląstelės membraną patekti į mikrobų ląsteles. Jis gali pakeisti kenksmingų mikroorganizmų, tokių kaip Escherichia coli ir Salmonella, gyvenamąją aplinką, keisdamas pH vertę ląstelių viduje ir neleisdamas jiems daugintis, taip reguliuodamas žarnyno mikroekologinę pusiausvyrą (eidelsburger, 1998). Kalio dikarboksilato poveikis žarnyno mikroflorai: makroskopiškai H+, susidaręs skaidantis kalio dikarboksilatui, sumažina žarnyno pH vertę ir slopina žarnyno mikrofloros augimą. Mikroskopiškai H+ patenka į bakterijų ląsteles per ląstelės membraną, tiesiogiai sunaikina viduląstelinių fermentų aktyvumą, veikia mikrobinių baltymų ir nukleorūgščių metabolizmą ir atlieka svarbų vaidmenį sterilizacijoje (Roth, 1998). Rezultatai parodė, kad kalio diformiatas mažai paveikė bendrą jūros agurkų žarnyno bakterijų skaičių, tačiau galėjo reikšmingai slopinti Vibrio skaičių.

2.4 Kalio dikarboksilato poveikis jūros agurko Apostichopus japonicus atsparumui ligoms

Vibrio splendens yra patogeninė jūros agurkų odelės puvinio sindromo bakterija, kenkianti jūros agurkų auginimui ir auginimui. Šis eksperimentas įrodė, kad kalio dikarboksilato įdėjimas į pašarus sumažino jūros agurkų, užkrėstų Vibrio brilliant, mirtingumą. Tai gali būti susiję su kalio diformiato slopinamuoju poveikiu Vibrio.

3 Išvada

Rezultatai parodė, kad pašaruose esantis kalio diformiatas turėjo reikšmingą poveikį Apostichopus japonicus augimui, teigiamai paveikė nespecifinį Apostichopus japonicus imunitetą ir sustiprino humoralinį bei ląstelinį Apostichopus japonicus imunitetą. Kalio dikarboksilato pridėjimas į pašarą reikšmingai sumažino kenksmingų bakterijų skaičių jūros agurkų žarnyne ir padidino jūros agurkų, užkrėstų Vibrio brilliant, atsparumą ligoms. Apibendrinant galima teigti, kad kalio dikarboksilatas gali būti naudojamas kaip imunitetą stiprinanti medžiaga jūros agurkų pašaruose, o tinkama kalio dikarboksilato dozė yra 1,0 %.